酶聯免疫吸附測定,什么是酶聯免疫吸附法?
1、什么是酶聯免疫吸附法?
酶聯免疫吸附法(enzyme:linked:immunosorbent:assay,ELISA)是把抗原—抗體的免疫反應與酶的催化反應相互結合而發展起來的一種綜合性技術,它的靈敏度高,特異性強,特別是當寄主體內病毒濃度很低或同時存在病毒鈍化物或抑制劑時,它的優勢尤為明顯,因而是近年來病毒檢測方法中發展最快、應用最廣的一種方法。
此方法的原理是利用以酶標記的特異抗體來指示抗原—抗體的結合,從而檢出樣品中的抗原。
具體操作程序是:將待檢植物汁液(抗原)注入酶聯板(聚苯乙烯多孔微量反應板)中,使抗原吸附于它的孔壁,然后加入以酶標記的特異抗體,待抗原與抗體充分反應后,洗去未與抗原結合的多余酶標記抗體,于是在固相載體酶聯板表面就只留下以酶標記的抗原—抗體復合物。這時加入酶的無色底物,復合物上的酶催化底物降解,生成有色產物,其強度與病毒濃度呈正比。這一結果可用肉眼識別,也可用分光光度計對底物的降解量進行測定。
2、什么是酶聯免疫吸附試驗?
看到一篇關于組織生理學方面的論文,里面用到這樣的方法。因為是外行,所以想問這個測試一般用于什么方面?
3、酶聯免疫吸附測定的原理是什么?
原理是抗原與抗體之間的特異性結合。酶聯免疫吸附是在固相載體上包被好能與目的抗原特異性結合的抗體,當檢測樣本中含有目的抗原時,其會與固相載體上的抗體相結合,并加入和鏈接化學發光酶,通過沖洗去掉其他非目的抗原,加入顯色底物與之反應,此時吸光度越大也就是顏色越深的就說樣本中明目的抗原越多,沒有顏色反應的就是不含有目的抗原。
酶聯免疫吸附測定,是指利用抗體分子能與抗原分子特異性結合的特點,將游離的雜蛋白和結合于固相載體的目的蛋白結合,并利用特殊的標記物對其定性或定量分析的一種檢測方法。其原理是:抗原或抗體能物理性地吸附于固相表面,并且保持其免疫活性;抗原或抗體能與酶通過共價鍵形成酶結合物,同時保持各自的免疫活性或酶活性;酶結合物與相應的抗原或抗體結合后,能通過加入底物的顏色反應來確定免疫反應的發生,顏色反應的深淺與標本中相應抗原或抗體的量成正比。
4、醫學上ELISA,是什么意思。
酶聯免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay,簡寫ELISA)
指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結合進行免疫反應的定性和定量檢測方法;酶聯免疫吸附測定(ELISA)為免疫學中的經典實驗。
基本原理為:使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。
結果判斷——
1、定性測定:
定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統中有反應。"陰性"則為無反應。
2、定量測定:
ELISA操作步驟復雜,影響反應因素較多,特別是固相載體的包被難達到各個體之間的一致,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。
來源:百度百科-ELISA
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